如何测定青稞秸杆中蛋白质含量

　　我国年产秸杆达5亿吨，其中除少部分秸杆用作牛羊等反刍动物饲料或还田作肥料外大部分秸杆被焚烧、废弃既造成了资源的巨大浪费也对环境产生污染。青稞（HordeumVulgerL.var.nudumHook.f）在植物分类学上属于禾本科小麦族大麦属于大麦变种之一，在其他产区也称米大麦、米麦、裸麦。主要分布在我国西藏、四川、云南、甘肃、青海等地。青稞秸杆中含有许多有营养物质如：氨基酸、微量元素、β—葡聚糖等，是自然界存在的巨大的可再生资源，为充分利用这一营养的可再生资源，本文对其秸杆中蛋白质的含量进行测定。蛋白质是生命的物质基础，是构成生物体细胞的重要成分，是生物体发育及修补的原料，一切有生命的活体都含有不同类型的蛋白质。人及动物只能从食品得到蛋白质及其分解产物，来构成自身的蛋白质，故蛋白质是人体及动物重要的营养物质，也是食品中重要的营养指标。其具有糖类和脂肪不可代替的作用，是动物生长发育所必要的营养元素之一,是氨基酸以肽键相结合形成的、极其复杂的高分子化合物，是生物体主要的含氮物质。饲料是否合格，粗蛋白含量多少是一项重要指标。下面就用饲料中粗蛋白含量的常规方法—凯氏氮法测定其蛋白质的含量。

　　仪器及试剂：仪器为药物粉碎机、分析天平、凯氏定氮仪（包括凯氏定氮蒸馏装置和消化炉）、凯氏烧瓶。试剂为浓硫酸（AR级）；50%氢氧化钠溶液；硫酸钾；硫酸铜；0.1mol/L盐酸标准溶液；甲基红-溴甲酚绿混合指示剂。本文我们采用GB/T5009.5—2003标准法来测定蛋白质含量。

　　实验过程：将成熟后的枯黄的茎秆粉碎过筛后备用。去试样0.500～2.000g准确至0.0002g，放入凯氏烧杯中，加入10g无水硫酸钾0.5g硫酸铜和20ml浓硫酸。和2粒玻璃珠，将凯氏烧杯置于电炉上加热，开始小火，代样品焦化，泡沫消失后，再火力直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，约2h；去出凯氏烧瓶加入约200ml蒸馏水，连接定氮蒸馏装置，将馏出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含数滴甲基红的01.mol/L标液的三角烧瓶中，在凯氏烧瓶内加入少许沸石缓缓加入80ml50%氢氧化钠溶液，立即连接好定氮球，检查整个定氮装置是否漏气，用直接火源加热蒸馏，蒸馏至凯氏烧瓶内残渣三分之一时，打开定氮球与凯氏烧瓶的塞口，停止加热；1）用0.1000mol/LHCl标液进行滴定，移取样品至锥形瓶中用0.1000mol/LHCl标液进行滴定，直至标准溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。此时消耗盐酸的量记为V2；2）空白实验取与消化样品时同样的量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸，按上述方法进行消化、定容到100ml，的空白消化液，取同量空白消化液进行蒸馏，用指示剂滴定至红色消失为终点。此时消耗盐酸的量记为V1。

　　结果计算：总氮量（%）=C*（V2-V1）÷1000×14.1/w；注C-盐酸的摩尔溶液；V1-空白滴定消耗标准液的量（ml）；V2-样品滴定消耗标准酸液的量（ml）；w-样品的质量；14.1-氮的摩尔质量。蛋白质（%）=总氮量%*K；K-氨转换为蛋白质的系数取5.7。

　　结论：从我们的的实验结果发现，这批青稞秸秆蛋白质含量较低，平均为1.482，与作为饲料时蛋白质含量在2-8%之间还有一定的差距。因此直接将青稞秸秆作为饲料是不合理的，因为其蛋白质含量低、质地粗硬，适口性差且不易消化和吸收，但是秸秆中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所积累的一半能量，且分布广泛，竞争性用途少，开发利用潜力很大。