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凯氏定氮仪测定蛋白质的化学反应方程式
发布时间:2021-09-14   点击次数:11次
   凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法。蛋白质测定常用的方法就是凯氏定氮法,它是通过测定氮含量从而换算成蛋白质的方法,是国际上通用的标准方法,其优点为实验操作简单、方便,测量结果的重复性和重现性好,而被广泛应用于各类食品、谷物、饲料等样品的蛋白质含量测定中。凯氏定氮法分为常量、半微量、微量法三种方法,其原理是食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。
  一、实验目的:测得样品纯牛奶中粗蛋白含量
  二、实验设备及要求:
  1、实验设备:天平、凯氏定氮仪以及消解仪
  2、实验要求:测试环境要求洁净,测试所用试剂与器皿均要求洁净;
  三、该方法的化学反应方程式为:
  2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4→(NH4)2SO4+CO2↑+SO2↑+16H2O
  此过程的注意事项:
  ①样品消化时,对于含糖量很高或含脂量较多的样品,应注意要缓慢升温加热,并随时注意控制加热的温度,避免产生大量泡沫喷出或喷溅到瓶壁上,造成样品的损失。若因加热温度不当,局部温度过高使消化液喷溅到瓶壁上,应及时转动凯氏定氮瓶将溅到瓶壁上的样品消化液冲下,也可在样品消化前加入少量辛醇或液体石蜡,以减少泡沫的产生。
  ②消化时应不定时旋转凯氏定氮瓶,将附在瓶壁上的碳粒冲下,使样品充分消化。
  ③若样品难以消化至澄清透明的程度,可将凯氏定氮瓶从加热器上取下,待其中溶液冷却至室温后,向消化液中加入少量过氧化氢,再继续加热直至完全消化。
  ④整个消化过程中硫酸的量要充足,以保证样品中含氮有机化合物的消化。样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量,因消化时脂肪消耗硫酸的量较大,使硫酸缺少而影响测定。
  ⑤在样品消化末期,即消化液呈蓝绿色并澄清透明后,再继续加热半小时即可,因此时瓶内消化液温度过高,若长时间加热,会使生成的硫酸氢铵分解并释放出氨气,使氮的含量损失,从而影响凯氏定氮仪的测定结果。

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