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凯氏定氮仪测定氮含量分哪三个步骤

更新时间:2023-09-15  |  点击率:4027
  凯氏定氮仪是一种常用的化学分析仪器,是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法,故被称为凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。被广泛应用于农业、环境科学和食品工业等领域。它能够准确测定样品中的氮含量,为相关研究和质量控制提供重要数据。
 
  凯氏定氮测定有三个步骤,即消化、蒸馏、滴定。
 
  消化:将含氮的有机化合物(蛋白质)与浓硫酸和催化剂(硫酸铜或凯氏消化片)一同加热,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨(NH3)并与硫酸结合形成硫酸铵。(铵 NH4+)
 
  消化过程:微火加热煮沸,烧瓶内物质炭化变黑,产生大量泡沫,泡沫消失后加大火力保持微沸状态,至液体成蓝绿色澄清状态后继续加热 05-1h,结束后冷却。(可使用自动消解仪完成前处理工作)
 
  蒸馏:得到的溶液经稀释定容后加入NaOH,蒸馏释放出NH3,冷凝之后收集于硼酸溶液中。
 
  蒸馏过程:先将消化好的样品进行稀释,加入NaOH,经过加热后产生的氨气进入冷凝管,经过冷凝之后流入装有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸铵。(硼酸溶液中加有混合指示剂,形成硼酸铵之后吸收液由酸性变为碱性,颜色由紫红转变为蓝绿色。)
 
  滴定:用已知浓度的盐酸标准溶液进行滴定,根据盐酸消耗的量来计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,即得到蛋白质的含量。(滴定是指一种定量分析的手段,也是一种化学实验操作。它通过两种溶液的定量反应来确定某种溶质的含量,是根据指示剂的颜色变化指示滴定终点,然后目测标准溶液消耗体积,计算分析结果。)
 
  滴定过程:用盐酸标准溶液滴入硼酸铵溶液中,使溶液的颜色由蓝绿色变为浅红色。
 
  测定过程还包括样品预处理、消解与提取以及氮的测定。通过准确测定样品中的氮含量,凯氏定氮仪在农业、环境科学和食品工业等领域具有广泛的应用。这些应用包括土壤和植物组织中氮素含量的测定、水体和土壤中氮素的监测以及食品样品中蛋白质含量的测定等。凯氏定氮仪的应用为相关研究和质量控制提供了可靠的数据支持。通过准确测定样品中的氮含量,推动了科学研究和工业领域的发展。
 
 

凯氏定氮仪