凯氏定氮仪对蛋白质含量的测量步骤

　　凯氏定氮仪是对生活中的含有蛋白质的东西进行测量的。粗蛋白是衡量饲料原料、饲料产品zui重要的指标之一。粗蛋白在化验室的检测频率zui高。“粗蛋白”的测定是用凯氏定氮仪测定的，即在崔化剂的作用下，用硫酸在高温下使样品中的有机物分解、脱水，使蛋白质和氨化物转变成无机态氨和浓硫酸生成硫酸铁;硫酸铁在强碱作用下，经蒸馏放出氨气，经冷凝的液态氨被硼酸吸收生成四硼酸按，用标准酸滴定以确定样品中的含氮量，所测含氮量乘以6.25，即为样品中粗蛋白的含量。反应过程分为消化、蒸馏、滴定三步。蛋白质测定仪即是根据以上原理设计而成的。

　　凯氏定氮仪是测定食品中蛋白质含量的经典方法，测定结果稳定，准确。其中凯氏定氮仪、蛋白质测定仪都是利用凯氏定氮法设计的，但是全自动蛋白质测定仪价格昂贵，目前尚难普及。而相应的凯氏定氮仪却得到了相关人士的认可。因为相较于全自动蛋白质测定仪，凯氏定氮仪的性价比更高，而且其测定结果与标准法测定无显著差异。

　　凯氏定氮仪作为蛋白质含量测定的*仪器，具有不可撼动的地位。用凯氏定氮仪测定蛋白质含量，其步骤如下：

　　1.样品消解：准确称取0·5~2·0 g混匀固体样品或吸取5·0~10·0 ml液体样品于干净的消化管内，加0·5 ~1·0 g硒粉或10 g硫酸钾+1 g硫酸铜， 10ml硫酸，摇匀，加10 ml过氧化氢，混匀，将消化管放入消化器，放上装好密封圈的排污管，打开抽气三通进水，使抽气三通处于吸汽状态。接通电源，进行消化，如遇难消化的奶粉等样品，可于消化过程中适当增加过氧化氢的加入量，至消化液呈透明蓝绿色液体，关闭电源，冷却，定容至100 ml。此过程约需1~2 h。

　　2.测定：打开电源，按仪器说明书调试凯氏定氮仪进入待机状态(约0·5 min)。把装有50 ml硼酸溶液及2~3滴指示液的三角瓶放到接收托盘上，接收管插入液面，再将内装适量消化样品的消化管放到蒸馏器上，加20 ml纯水及消化时硫酸5倍量的氢氧化钠液，打开蒸汽开关进行蒸馏。当流出液至150 ml左右时下移接收瓶，使接收管脱离液面，用纯水冲洗接收管，继续蒸馏0·5 min，结束。取下消化管，关掉蒸汽开关，凯氏定氮仪还原到待机状态。馏出液用0·0500 mol/L的盐酸标准溶液滴定至淡紫色为终点，计算蛋白质含量。同时做试剂空白实验。

　　与粗蛋白测定仪相比，凯氏定氮仪只是较后者少了消化炉，而其测定结果能够满足实验室的需求。因此，凯氏定氮仪在很多地方都得到了认可。